正答2
解説
正解は2です。
免疫組織化学染色の手順と試薬の基本を問う問題です。
【選択肢別解説】
1：× ホルマリン固定パラフィン包埋切片は、免疫組織化学染色で最も一般的に用いられる材料です。
固定で隠れた抗原は、加熱などの抗原賦活化で回復させます。
2：○ 赤血球などに含まれる内因性ペルオキシダーゼは、偽陽性の原因になります。
過酸化水素を加えたメタノールで処理して、その活性を阻害します。
3：× 抗体反応後に切片を乾燥させると、非特異的な染色やむらの原因になります。
反応後は緩衝液で洗浄し、乾燥させずに次の反応へ進みます。
4：× 二次抗体は一次抗体を認識する抗体なので、一次抗体とは異なる動物種で作られたものを用います。
たとえばマウスの一次抗体には抗マウス抗体を用います。
5：× ジアミノベンジジン〈DAB〉はペルオキシダーゼの反応で茶褐色に発色します。
赤色に発色する代表的な発色基質はアミノエチルカルバゾール〈AEC〉です。
【ポイント】
免疫組織化学染色では、抗原賦活化、内因性ペルオキシダーゼの阻害、非特異反応のブロッキングが重要な前処理です。
DABの茶褐色は脱水・封入しても退色しにくい利点があります。